李瑞玲 , 叶云天 , 江雷雨 , 刘勇强 , 叶宇芸 , 李亚丽 , 肖婕 , 李欣 , 汤浩茹^*

四川农业大学园艺学院, 成都, 611130
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2018 年, 第 16 卷, 第 6 篇   
收稿日期: 2017年09月13日    接受日期: 2017年09月13日    发表日期: 2018年06月21日

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草莓 Fra a 是一类过敏原蛋白。为研究 Fra a 蛋白致敏机理，本研究根据已知的栽培草莓(Fragaria伊ananassa) Fra a 序列设计引物，从“红颜”草莓中克隆得到三个 Fra a 基因序列，其 ORF 长度分别为 483 bp、483 bp 和 480 bp，各自编码 160 个、160 个和 159 个氨基酸，分别命名为 FaFra a 1、FaFra a 2 和 FaFra a 3。生物信息学预测表明其均具有 bet v 1 家族保守结构域，预测蛋白均无跨膜结构域和信号肽。FaFra a 1 与桃的氨基酸相似度为 81%，李、杏为 80%；FaFra a 2 与月季的氨基酸相似度为 82%，苹果、樱桃为81%；FaFra a 3 与月季的氨基酸相似度为 92%，苹果为 83%。Fra a 与蔷薇科植物的进化关系更近。构建原核表达载体 pET32afraa1、pET32a-fraa2 和 pET32a-fraa3，转化到大肠杆菌 BL-21 (DE3) pLysS 菌株并诱导融合蛋白表达，结果表明目的蛋白 Fra a 1、Fra a 3 在原核表达系统中能顺利表达，Fra a 1 在上清、沉淀中均有大量分布，Fra a 3 主要存在于沉淀中。未得到 Fra a 2 目的蛋白。本研究为进一步了解 Fra a 的功能和制备抗体提供了理论依据。

草莓；过敏原蛋白；克隆；原核表达；黄酮类化合物